土壤总酚含量测定试剂盒

土壤总酚含量测定试剂盒

本试剂盒仅供科研使用 1 土壤总酚含量测定试剂盒说明书 (货号: WS9430F 分光法 48 样 ) 一、产品简介： 土壤中的酚类物质主要由植物释放，以及植物残体和凋落物分解产生。由于酚类物质的 难降解性，其在土壤中的积累会影响土壤的碳氮转化和温室气体排放，进而会使土壤肥力 衰退。另外，酚类物质对土壤有机质矿化和养分循环也有着重要影响。 本试剂盒采用福林酚法测定土壤中酚类物质含量，在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还 原，产生蓝色化合物，在 750nm 处有特征吸收峰，通过检测在 750nm 处的吸光值，进而 计算土壤中酚类物质含量。 二、所需的仪器和用品： 可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、天平、离心机。 三、试剂盒组分与配制： 试剂名称 规格 保存要求 备注 提取液 液体 60mL×1 瓶 4℃保存 试剂一 液体 25mL×1 瓶 4℃保存 试剂二 液体 5mL×1 瓶 4℃保存 标准品 粉体 mg×1 支 4℃保存 若重新做标曲，则用到该试剂 四、土壤总酚含量的测定： 建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验 样本和试剂浪费！ 1、样本制备： 称取约 0.5g 土壤样本，加入 1mL 提取液，室温振荡提取 30min。25℃×8000rpm，离 心 10min，取上清待测。 2、上机检测： ① 可见分光光度计预热 30min，调节波长至 750nm，蒸馏水调零。 ② 在 1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）中依次加入： 试剂名称（µL） 测定管 空白管（仅做一次） 样本 180 蒸馏水 180 试剂一 450 450 试剂二 90 90 混匀，25℃室温静置 30min，全部液体转移至 1mL 玻璃 比色皿（光径 1cm）中，测定 750nm 吸光值 A，ΔA=A 测定-A 空白。 【注】:1.吸光值大于 1.2，上清液用蒸馏水适当稀释再测定，计算公式里乘以稀释倍数 D。 2.若ΔA 在零附近，可增加土壤取样质量 W，或加大样本上样量 V1（如增至 300µL，则 试剂一相应减少，保持总体积不变），则改变后 W 和 V1 需代入计算公式重新计算。 五、结果计算： 1、标准曲线：y = 0.0712x - 0.0036，x 是标准品质量(µg)，y 是ΔA。本试剂盒仅供科研使用 2 2、土壤总酚含量(µg/g 土壤)=(ΔA+0.0036)÷0.0712÷(V1÷V×W)×D =78.03×(ΔA+0.0036)×V÷W×D V---加入提取液体积，1mL； V1---反应中样品体积，0.18mL； D---稀释倍数，未稀释即为 1； W---土壤取样质量，g。 附：标准曲线制作过程： 1 制备标准品母液（10mg/mL）：向标准品 EP 管里面加入 1mL 蒸馏水，超声*全溶解。 2 把母液用蒸馏水稀释成五个浓度梯度的标准品：0, 0.02, 0.04, 0.06,0.08,0.1 mg/mL。 也可根据实际样本来调整标准品浓度。 3 依据测定管的加样体系操作，根据结果即可制作标准曲线。