细胞STR鉴定检测服务

细胞STR鉴定检测服务

送样要求：

1. 基因组DNA: OD 260/280 在1.8～2.0之间, 浓度≥50ng/μl,体积≥20μl；

2. 组织块：介于绿豆粒~黄豆粒大小之间即可，

3. 新鲜细胞：（1）细胞数≥10⁶；（2）贴壁细胞经胰蛋白酶消化后，离心收集细胞沉淀；（3）悬浮细胞直接离心收集细胞沉淀；（4）PBS清洗细胞沉淀，尽可能去除培养基与胰酶；

4. 冻存细胞：细胞数≥10^6，冻存细胞从液氮罐中，37℃水浴复苏，融化后离心收集细胞沉淀，尽可能去除冻存液，否则会影响DNA抽提质量；

5. 样本寄送：应在送样包裹中放置冰袋或干冰，建议顺丰快递；

6. 为了保证DNA抽提质量，确保细胞在消化或冻存前，细胞状态良好，处于生长对数期；

不建议以细胞悬液或细胞培养瓶形式寄送样本

细胞STR鉴定样本收集步骤参考

收集悬浮细胞沉淀步骤：

1.将细胞悬液转移至离心管中

2. 200X g，离心10min，收集细胞

3. 移除上清液，用PBS清洗细胞沉淀1-2次

4. 最后200X g，离心10min，收集细胞沉淀

收集贴壁细胞沉淀步骤：

1.移除细胞培养基。

2.沿着培养皿壁缓慢加入PBS（无钙镁离子），勿将细胞冲离培养皿，温和晃动培养皿，清洗细胞表面。

3.移除PBS。

4.加入细胞消化液（如胰蛋白酶等），使消化液能覆盖所有细胞。在37℃孵育2-3min，温和晃动培养皿知道细胞开始剥离培养皿。

5.加入培养基终止消化，温和重悬细胞

6.200X g，离心10min，收集细胞

7.移除上清液，用PBS清洗细胞沉淀1-2次

8.最后200X g，离心10min，收集细胞沉淀

支原体检测样本制备：建议送检上清

1.贴壁细胞上清液或细胞沉淀制备

贴壁细胞上清液制备：在无抗生素及其它抑菌或灭菌物质条件下培养 3 天，汇合度达到90% 左右时，直接吸取  1.0ml 细胞培养上清液移至  1.5ml 离心管中。

贴壁细胞沉淀制备：上述（a）贴壁细胞收取完上清后，加入1ml PBS，使用细胞刮刮取细胞，吸取转移至1.5ml离心管，12000rpm离心沉淀细胞。（如果使用胰酶消化细胞，需要10ml PBS洗三遍后，1ml PBS重悬沉淀，然后转移至1.5ml离心管，12000rpm离心获得细胞沉淀。）

2.悬浮细胞上清液或细胞沉淀制备

悬浮细胞上清液制备：在无抗生素及其它抑菌或灭菌物质条件下培养 3 天，500g离心5min，直接吸取  1.0ml 细胞培养上清液移至  2ml 离心管中。

悬浮细胞沉淀制备：上述（c）吸取上清液后的沉淀，加入1ml PBS重悬沉淀，然后转移至1.5ml离心管，12000rpm离心10min，弃上清，获得细胞沉淀。