DiR染料是一种近红外荧光染料,常用于细胞标记和活细胞示踪。它的特点是具有高度的疏水性和光稳定性,适合用于体内成像和长时间追踪细胞。以下是正确使用
DiR染料进行细胞标记的步骤:
1、选择适当的细胞类型:首先要选择适合您研究目的的细胞类型,确保它们是您要研究的对象。
2、准备溶液:将其溶解在合适的溶剂中,如二甲基亚砜(DMSO)或乙醇。根据厂家提供的建议浓度来配制染料溶液。
3、染色:将溶液加入培养基中,使其终浓度在0.5-5µM之间。将培养基含有染料的溶液加入到培养皿中,然后将细胞悬浮物加入其中,轻轻摇动培养皿使细胞均匀受染。
4、孵育:将含有DiR染料的细胞培养皿放入CO2培养箱中孵育一段时间(一般为30分钟至2小时),以确保细胞充分吸收染料。
5、洗涤:使用含有培养基的离心管洗涤细胞,去除未被吸收的多余染料。
6、观察:将染好细胞置于荧光显微镜下观察,使用适当的滤光片观察荧光信号。
7、实验:根据您的研究目的,可以将染有染料的细胞用于体内或体外实验。在体内实验中,可以将细胞注射到动物体内进行追踪;在体外实验中,可以进行细胞培养和功能实验。
8、存储:将未使用的溶液存储于-20℃避光处,避免染料的光降解。
9、注意事项:在使用时,应注意避免与皮肤和眼睛接触,避免吸入其蒸汽。在处理时,应佩戴实验室手套和护目镜。
总之,正确使用DiR染料进行细胞标记需要注意染料的配制、染色、洗涤和观察等步骤,以确保成功标记细胞并获得准确的实验结果。希望以上步骤和注意事项对您有所帮助!