1、DiD、DiO、DiI、DiR和DiS细胞膜染色液的制备
(1)DMSO或EtOH储存溶液的制备：应制备浓度为1~5mM的DMSO和EtOH-储存溶液。
注：未使用的储存溶液应在-20℃下储存，以避免反复冷冻和解冻。
(2)工作溶液的制备：用合适的缓冲溶液(如无血清培养基、HBSS或PBS)稀释储存溶液，制备浓度为1-5µM的工作溶液。
注：工作溶液的最终浓度是根据不同细胞的经验和实验制备的。在建议浓度的十倍以上可以找到良好的条件。
2、悬浮细胞染色
(1)悬浮池密度为1×向工作溶液中添加106/mL。
(2)当细胞在37℃培养2至20分钟时，不同的细胞可以培养不同的时间。
(3)染色细胞管以1000～1500rpm离心5分钟。
(4)倒入上清液，再次缓慢加入37℃预热的培养液。
(5)重复步骤(3)和(4)两次以上。
3、贴壁细胞染色
(1)贴壁细胞在无菌实验室中培养。
(2)从培养基中取出盖玻片，吸出多余的培养液，并将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)将100加到盖玻片μL染料工作液的一角，轻轻摇动，使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)当细胞在37℃培养2至20分钟时，不同的细胞可以培养不同的时间。
(5)吸取染料工作液，用培养液清洗盖玻璃2-3次，每次用预热的培养基覆盖所有细胞，培养5-10分钟，然后吸取培养基。
