1、将封板膜贴在板子上从自封袋中取出单张封板膜,然后重新封好自封袋,以保持其中的无酶环境。保持底衬面朝上,握住封板膜,沿着切线处慢慢撕下底衬。
随后,将封板膜粘性面的一端贴在板子上,掌握好距离和角度,避免后续贴歪。贴的过程中一端贴,另一端拉住。
2、压膜
使用压膜板缓慢刮压封板膜,使其全部密封到板上。假如没有专用的压膜板,可以找一个边缘光滑的卡,比如没有钱的银行卡或公交卡等。压膜步骤应至少水平和垂直执行两次。施加足够的力(也别太大力)对于获得良好的密封性至关重要。
将压膜板沿着孔板的所有外边缘刮压至少两次,确保施加坚定而持续的压力。孔间和边缘要都要压一遍。
3、检查
密封后仔细检查平板,确认薄膜与板之间是否紧密贴牢。确认每个孔周围的粘贴痕迹,平板的整个表面(包括周边)都被密封,以及膜上是否有液体。封板膜不应出现褶皱,如果观察到皱纹,则说明板未正确密封。
注意事项:
(1)注意对于边缘凸起的平板,封板膜在板上定位可能不正确,要避免膜向上延伸到板的侧壁上;
(2)在开始PCR实验前之前将密封的平板放置至少10分钟,封板膜的粘合力将随着时间增加;
(3)有条件话,使用孔板专用离心机离心。
4、最后,将封好的板转移到PCR仪上,可以开始实验了。