ECL超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶（HRP）的抗体及其关联的抗原。其原理是，蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上，以一抗及HRP标记的二抗结合膜上的目的蛋白，或以HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的ECL工作液，室温孵育膜数分钟，将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于X光片曝光暗盒。然后转入暗室将X光胶片压在膜上曝光数秒到数小时，显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在X光胶片上。
ECL超敏发光液的操作方法：
1．按每平方厘米膜面积用配置发光液：根据发光液的需要量，取等体积A液和B液，混匀后避光保存备用；该发光液必须现配现用。
2.取出膜，平放在干净的保鲜膜上，膜的正面（蛋白质面）朝上，在膜的中央加适量的配置好的发光液，溶液向四周迅速扩散，覆盖所有膜面。室温保温5分钟左右，在此过程中请仔细观察信号的出现。注意：如果信号强，在暗室中能很快看到阳性信号出现。
3.待信号出现且稳定后，用镊子夹起膜，除去多余的发光液，平放在干净的保鲜膜上，膜的正面（蛋白质面）朝上，在转移膜的上面再覆盖一层保鲜膜，除去保鲜膜与转移膜之间的空气泡，请务必保证保鲜膜是干净的，不被其他杂物或液体污染。
4.在暗室中，将膜的正面对着X-光片，放入暗盒。第一次曝光时间在1分钟左右(有经验的操作者可以根据信号的强弱自行决定)，立即按要求对X-光片进行显影和定影，确定最佳曝光时间。曝光时间从数秒到数小时不等；特别弱的过夜曝光也可。
