弗式不*佐剂是一种油包水的乳浊液,含结核分枝杆菌的细胞壁成分。弗式不*佐剂活性来自于油滴中免疫原的持续释放,并刺激局部免疫反应。弗式不*佐剂用于初次免疫刺激。为了减少副作用,不含结核分枝杆菌成分的弗式不*佐剂用于加强免疫。
弗式不*佐剂的抗原乳化可按如下方法进行:
(1)研磨法:先将弗式不*佐剂加热并取适量放入无菌的玻璃研钵内,待冷却后再缓缓滴入等体积的抗原溶液,边滴边按同一方向研磨,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,继续研磨一段时间,使之成为乳白色粘稠的油包水乳剂。本法适于制备大量的弗式不*佐剂抗原,缺点是研钵壁上粘附大量乳剂,抗原损失较大。
(2)注射器混合法:将等量的弗式不*佐剂和抗原溶液分别吸入两个注射器内,两注射器之间以一细胶管相连,注意排净空气,然后交替推动针管,直至形成粘稠的乳剂为止。本法优点是容易做到无菌操作,抗原损失少,适用于制备少量的抗原乳剂。但同时难以乳化*,个别抗原,用塑料注射器根本推不动,而用玻璃注射器又有渗漏。制备好的乳化剂经鉴定才能适用。鉴定方法是将乳化剂滴入冷水中,若保持完整不分散,成滴状浮于水面,即乳化*,为合格的油包水剂。
(3)超声:实验室条件好点的,比如说有超声破碎仪的,一定要控制超声频率和时间,超声容易激发一些自由基,对抗原有未知损害。乳化方法要根据抗原和需要而定。